Джон Легуизамо родился Боготе, столице Колумбии. Учился в Институте Ли Страсберга, студии Херберта Бергхофа, изучал театральное искусство в Нью-Йоркском университете. Актер получил признание за свои сценические роли в комедийных шоу, и он несколько лет выступал как комик в различных клубах, а также снимался в небольших независимых фильмах. В кино же впервые Легуизамо появился в фильме "Военные потери", затем исполнял небольшие роли, в основном латиноамериканских персонажей, хотя на его счету такие фильмы, как "Крепкий орешек - 2", "Относительно Генри", "Супербратья Марио", "Путь Карлито". Критика и зрители отметили интересную работу актера в фильме "Вонг Фу, спасибо за все! Джули Ньюмар", в котором он снялся вместе с Патриком Суэйзи и Уэсли Снайпсом.